麻豆e奶女教师国产剧情,伊人色综合久久天天伊人,日韩人妻一区二区三区蜜桃视频,欧美激情AAAAAAAA片

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法

    消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法

    發(fā)布時(shí)間: 2023-06-28  點(diǎn)擊次數(shù): 1229次
    非特異性擴(kuò)增,即進(jìn)行 PCR 所擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是所要的,引物與模板在非目的條帶處有錯(cuò)配,導(dǎo)致延伸產(chǎn)物不是目的條帶。例如引物二聚體,即引物在退火過(guò)程中產(chǎn)生了 hairpin 結(jié)構(gòu)或其他二級(jí)結(jié)構(gòu),或者引物在模板的某些位置非特異性地結(jié)合,也同樣會(huì)產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。PCR 產(chǎn)物都是通過(guò)引物延伸產(chǎn)生的。當(dāng)引物產(chǎn)生了二聚體或者非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物之后,引物本身就無(wú)法再延伸形成 PCR 產(chǎn)物了,這樣的情況下,非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物越是多,那目的產(chǎn)物就越是少。如果在 qPCR 過(guò)程中,就會(huì)在熔解曲線中形成雙峰。

    消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法:
    1、引物設(shè)計(jì)的過(guò)程中要用 Primer premier 5.0 來(lái)驗(yàn)證一下二聚體;
     
    2、 引物合成后,先做一次梯度 PCR,檢測(cè)最合適的退火溫度,一般高退火溫度可以提高引 物對(duì)模板的特異性從而降低引物二聚體;
     
    3、 降低 Mg2+濃度,鎂離子濃度高,會(huì)導(dǎo)致大量的非特異性擴(kuò)增,但是沒(méi)有鎂離子的話,也會(huì)導(dǎo)致 Taq 酶的失活;
     
    4、降低 dNTP 濃度,dNTP 也是非特異性擴(kuò)增的一個(gè)罪魁禍?zhǔn)?,降低它的濃度,也能有效降低二聚體及其他非特異性擴(kuò)增;
     
    5、降低引物濃度,一般的 PCR 引物都是過(guò)量的,降低了引物濃度自然也能降低引物之間形成二級(jí)結(jié)構(gòu)的可能性;
     
    6、提高退火溫度,這個(gè)道理很簡(jiǎn)單,引物的退火溫度提高,引物間的二級(jí)結(jié)構(gòu)形成可能性就會(huì)降低;
     
    7、延長(zhǎng)退火時(shí)間,這個(gè)也可以減弱引物間結(jié)合的可能性;
     
    8、DMSO 及甜菜堿,這些 PCR 促進(jìn)劑,主要是用于 CG 含量高的模板上,降低 DNA 的二級(jí)結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生,但根據(jù)經(jīng)驗(yàn),加入 DMSO 之后需要同時(shí)提高一點(diǎn)退火溫度來(lái)補(bǔ)平(qPCR 不太適用);
     
    9、熱啟動(dòng)法,通過(guò) 95℃的高溫?zé)釂?dòng),高溫解鏈,使得引物間的二級(jí)結(jié)構(gòu)破壞,以此降低二聚體產(chǎn)生。


    深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O(shè)在廣東,服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開(kāi)發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。


產(chǎn)品中心 Products
99久久国产露脸国语对白| 风韵少妇性饥渴推油按摩视频| 免费看国产曰批40分钟无码| 女学生被躁到高潮免费视频| 高h各种姿势调教1v1| 被仇人调教成禁脔h虐| 日韩三级| 黑人巨大三根一起进| 国产老头老太作爱视频| 无码av久久久久久久久| 欧美xxxxx高潮喷水麻豆| 护士夏子的热情夏天| 小13箩利洗澡无码视频网站免费| 蜜桃成人无码av在线观看一电影| 极品粉嫩国产18尤物在线播放| 猛烈顶弄h禁欲医生h怀孕| 亚洲熟妇无码久久精品| 国产精品人妻一区二区三区四区| 国产乡下妇女做爰| juliaann精品艳妇| 性饥渴寡妇肉乱免费视频| 日韩一卡2卡3卡4卡| 蜜桃色欲av久久无码精品| 23部禽亲女小丹慢慢张开双| 成年女性和成年男性bmi| 高清破外女出血视频全过程| 亚洲欧美精品aaaaaa片| 中文字幕日本人妻久久久免费| 律师的小秘书1v1h| 久久精品国产亚洲av忘忧草18| 波多野结衣乳巨码无在线观看| 正面偷拍女厕36个美女嘘嘘| 女人下边被添全过程a片小说| 以吾之名在线观看| 台湾三级| 日本亲与子乱人妻hd| 少妇伦子伦精品无码| 国产成人av无码一二三区| 亚洲愉拍99热成人精品| 国产人妻大战黑人20p| 久久久久国产精品无套专区|